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质谱分析

 

质谱用于肽和蛋白质的序列测定主要可以分为三种方法:一种方法叫蛋白图谱(Protein mapping),即用特异性的酶解或化学水解的方法将蛋白切成小的片段,然后用质谱检测各产物肽分子量,将所得到的肽谱数据输入数据库,搜索与之相对应的已知蛋白,从而获取待测蛋白序列。将蛋白质绘制“肽图”是一重要测列方法。第二种方法是利用待测分子在电离及飞行过程中产生的亚稳离子,通过分析相邻同组类型峰的质量差,识别相应的氨基酸残基,其中亚稳离子碎裂包括“自身”碎裂及外界作用诱导碎裂。第三种方法与Edman法有相似之处,即用化学探针或酶解方法使蛋白或肽从N端或C端逐一降解下氨基酸残基,形成相互间差一个氨基酸残基的系列肽,名为梯状测序(Ladder sequencing),经质谱检测,由相邻峰的质量差即可知道相应氨基酸残基。

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