问题解答

More... 注意事项

• 样品类型及准备、运输要求

• 
  

  胶条/全谱分析送样要求
  

  
  

  样品	样品要求
  SDS-PAGE条带	考马斯亮蓝染色，条带清晰可见
  蛋白质溶液	蛋白质总量≥20µg
  组织样品	样品总量≥0.05g
  细胞样品	细胞数目≥10E6
  体液样品	血清≥200µL，尿液≥1mL，泪液≥1mL
  备注	1、建议客户留有备份样品。 2、信息要求：提供物种和鉴定要求（蛋白质鉴定或翻译后修饰鉴定）。 3、保存要求：样品致于进口EP管中（国产EP管容易引入塑料峰的污染）。 4、运输要求：液氮或者干冰运输。 5、服务周期：10个工作日，数量大于20个的另外咨询。

  
  
  iTRAQ/MRM/Label free/SILAC/SWATH/翻译后修饰分析送样要求
  
  

  样本	样品要求
  蛋白样本	每组样品300µg 蛋白质，重复的话翻倍，一般建议客户准备两份样品备用。
  组织样本	按照蛋白质组织提取效率（蛋白：组织=7%），考虑提取后续验证研究样本方便，建议0.1g 左右或更多组织。
  细胞样本	10E7个细胞，胰酶消化，按细胞冻存标准离心收集细胞即可。
  体液样本	血清 200µL以上，脑脊液200µL 以上，尿液1mL ，泪液1mL.

  
  
  转录组送样要求
  
  

  样本	样品要求
  组织样本	动物组织：＞2g； 植物组织：＞4g； 培养细胞：＞1×107 个； 血液样品：≥ 2ml。
  真核生物RNA	提供浓度≥ 200ng/μL，总量≥10μg的RNA（单次建库用量为5μg）；OD260/280介于1.8 ~ 2.2之间，OD260/230 ≥ 2.0，RIN ≥ 6.5，28S:18S≥1.0。
  原核生物RNA	提供浓度≥200ng/μL，总量≥10μg的RNA(单次建库用量为5μg)；OD260/280介于1.8 ~ 2.2之间，OD260/230 ≥ 2.0，RIN ≥6.5，23S:16S≥1.0，
  备注	1、确保RNA无降解； 2、送样时请标记清楚样品编号，管口使用Parafilm膜密封； 3、样品保存期间切忌反复冻融； 4、送样时请使用干冰运输。

  
  

• NES-32核酸提取仪使用注意事项

• 1、仪器应尽可能在室内使用，放置的台面应水平、牢固

  2、仪器应远离潮湿和有腐蚀性气体的场所

  3、仪器安装时，需有指定专业人员拆除运动部件的固定装置

  4、电源线链接时，仪器电源开关需处于关闭状态

  5、开机前检查电源是否与系统要求相符，还需确保工作舱内无异物，并且舱门处于关闭状态

  6、请确保磁棒套插到底部，操作过程中尽量只抓住磁棒套柄

  7、每次实验结束，需使用柔软的清洁布蘸75%的消毒酒精清洁磁棒，切勿施加很大的力

  8、每次实验结束，需使用柔软的清洁布蘸75%的消毒酒精清洁外壳

  
  

• 分子诊断系列使用注意事项

• 1.  各区物品均为专用，不得交换使用，避免污染，每次实验完后立即清洁工作台； 
  2.  使用不含荧光物质的一次性手套、一次性专用离心管、自卸式移液枪和带滤芯吸头； 
  3.  反应液分装时应尽量避免产生气泡，上机前注意检查各反应管是否盖紧，以免荧光物质泄露污染仪器；
  4.  加样时应使样品完全加入反应液中，不应有样品粘附于管壁上，加样后应尽快盖紧管盖； 
  5.  扩增完毕请立即取出反应管，密闭在专用塑料袋中，放于指定地点，等待统一处理； 
  6.  实验中用过的吸头请直接打入盛有1%的次氯酸钠的废物缸内，并与其他废弃物品一同灭菌后丢弃； 
  7.  工作台及各种实验用品应定期用1%的次氯酸钠、75%酒精或紫外灯进行消毒；
  8.  PCR反应混合液应避光低温保存； 
  9.  不同批号的试剂请勿混用，并请在有效期范围内使用。

  
  

More... 常见问题

• NES-32核酸提取仪使用常见问题

• 1、仪器不能开机？

       答：请检查仪器电源线是否正确连接在插座上，并且确保插座有效供电，重新开机；检查保险丝是否完好，如有烧毁请更新，重新开机。

  2、消毒紫外灯不亮？

       答：检查紫外灯管是否损坏，如损坏请更换，重新开机，并检查紫外灯是否恢复正常

  3、振动机构异响？

       答：检查测试舱内是否有异物；检查磁棒套是否放置到位；检查深孔板是否放置到位。

  4、提取过程中意外断电？

       答：若不能确定电网何时供电，则可用手动将磁棒套架和磁棒架上移，并将深孔板从深孔板托架中用双手移除，同时将深孔板盖上膜后放置到合适的位置。

            待电网重新稳定供电之后，重新开机。

  
  

• 分子诊断系列使用常见问题

• 1.  试剂盒如何使用？

       答：请仔细阅读产品使用说明书，确认试剂盒无缺失（某些产品试剂盒因涉及复杂操作，由2个或2个以上外包装盒组成，而且储存温度有可能不一样），试剂盒储存是否得当，说明书所要求的自备耗材（移液器枪头、离心管等）、试剂（无水酒精、纯水等）、设备（涡旋振荡器、金属浴锅、高速冷冻离心机、QPCR仪等）是否准备完毕，仪器设置是否正确（温度、时间、扩增程序、荧光通道等），以上都准备好以后才可以开始进行实验。 

  2.  采集荧光选择？ 

       答：一般在60℃采集荧光，通道选择FAM或530nm处。有个别特异性产品有差异，具体以产品说明书为准。内标的荧光通道也请参看说明书进行设置。 

  3.  PCR产品对耗材的一些特殊要求？

       答：除了丙肝产品需要进口的试剂或者处理过的耗材，其余的产品都可以用市面上通用的耗材。其中stepone/stepone PLUS 如果客户采用30ul体系，则常规耗材也可以，如果采用40ul耗材的话，必须用原装耗材。 

  4.  PCR仪器的选择? 

       答：我们的试剂通用性极好，对绝大部分市面上荧光定量仪器都适用，我们的试剂为荧光定量PCR试剂，不用于仅有扩增功能的普通PCR仪。 

  5.  PCR仪器多久维护一次？ 

       答：半年，这个需要仪器工程师进行清洁校准维护操作，使用卤素灯的仪器需要严格按照使用寿命定期更换灯源。长期不维护的PCR仪器会出现本底、荧光值、光路、污染等多种问题，直接影响PCR试剂的测试结果。

  
  

• 免疫诊断系列使用常见问题

• 1.  实验对标本及标本处理有什么要求？ 

       答：标本：要求血清或血浆标本；采集：抽取适量静脉血，可用普通生化、肝素、EDTA、草酸钾和ACD做抗凝剂的真空管，不能检测含有叠氮钠的样品，可立即离心，若采用没有抗凝剂红色普通管采血，待其自然凝固后离心，离心请用3000-4000rpm，10-30min；存放：标本2-8℃可储存一周，长期储存需-20℃冻存，忌反复冻融，针对同一患者应使用同一类型样本。

  2.  试剂盒如何储存以保证试剂的有效性？

       答：试剂盒储存标准：避光2-8℃冷藏，使用后板条放入铝箔袋中，密封干燥冷藏。 试剂盒在操作过程中，封口胶纸不能重复使用。