DNA Topoisomerase I

DNA Topoisomerase I
品牌	Code No.	包装量	价格	说明书
Takara	2240A	100 U	370 元
Takara	2240B (A × 5)	500 U	1,670 元

制品内容 (Code No.: 2240A)

DNA Topoisomerase I (20 U/μl)	100 U
10 × DNA Topoisomerase I Buffer	1 ml
0.1% BSA*	1 ml

* BSA在-20℃下易产生沉淀，应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。

制品说明

DNA Topoisomerase I 催化4种反应： 
1. 使环状超螺旋分子的超螺旋解开。 
2. 在单链环状DNA分子内形成绳结 (Knotting) 和解开绳结 (Unknotting)。
3. 催化具有互补碱基序列的环状单链DNA形成双链闭环状DNA分子。 
4. 2个环状双链DNA分子之中的一个存在DNA链的切口时，发生两个分子的连结反应 (Catenation) 或者逆反应 (Decatenation)。 本酶由于来源于小牛胸腺，与来源于原核生物的酶性质不同，即使在Mg²⁺不存在的条件下也显示活性。而且，原核生物由来的DNA Topoisomerase I 只作用负链的超螺旋分子，而本酶则能使正负两方的超螺旋分子均形成松散型。

保存

-20℃。

起源

Calf thymus

活性定义

在37℃、30分钟内把0.5 μg/50 μl的超螺旋pBR322 DNA完全转换成松散型的酶的活性定义为1 unit。

纯度

24 units的本酶和0.5 μg的超螺旋 pBR322 DNA在37℃下反应24小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

使用注意

pBR322 DNA和φX174 DNA的RF I (超螺旋分子) 用DNA Topoisomerase I 处理后电泳，胶中含溴乙锭 (EtBr) 时，反应前后DNA条带的位置不发生变化。这是因为由DNA Topoisomerase I作用而转换为松散型的DNA受EtBr的影响，再次变为超螺旋状态。因此，使用Topoisomerase I反应后，一般使用不含EtBr的琼脂糖凝胶电泳，电泳终了后再用EtBr染色。