Exonuclease III

Exonuclease III
品牌	Code No.	包装量	价格	说明书
Takara	2170A	5,000 U	210 元
Takara	2170B (A × 5)	25,000 U	950 元

制品内容 (Code No.: 2170A)

Exonuclease III (200 U/μl)	5,000 U
10×Exonuclease III Buffer	1 ml

制品说明

本酶具有作用于双链DNA的3’→5’外切酶活性。本酶对双链结构具有高度特异性，能降解平滑末端、3’凹陷末端及有切口的DNA，但是不能降解3’-突出末端。所以，可以用产生不同末端的限制酶通过双重降解 (Double digestion) 后，利用Exonuclease III的3’→5’的外切酶活性，从一端降解，得到互补的单链DNA和5’-P单核苷酸。
与BAL 31 Nuclease相比，本酶的碱基特异性较小，如在富含GC的位置上，由于反应停止的机率较低，可用于DNA的删除制作。

保存

-20℃。

起源

Escherichia coli BE257/pSGR 3

活性定义

以限制酶处理的小牛胸腺DNA为底物，在37℃、pH8.0的条件下，30分钟内产生1 nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。

纯度

1. 50 units的本酶和1 μg的Closed circular (RF I) pBR322 DNA在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。  2. 50 units的本酶和1 μg的pBR322-Pst I/BAP分解物在37℃下反应30分钟，DNA的电泳谱带与对照一致。

用途

1. 通过部分降解双链DNA片段，产生一部分单链DNA片段，作DNA聚合酶的底物。生成的DNA可用于双脱氧法序列分析。 2. 与单链特异性核酸酶 (S1 Nuclease或Mung Bean Nuclease) 合用制作DNA缺失片段。本酶对双链结构DNA具有高度特异性，对于双酶切DNA片段 (例如EcoR I-Pst I Fragment) 能制作单向 (EcoR I 方向) 缺失的DNA。 3. DNA-蛋白质相互作用分析。

使用注意

1. 存放6个月以上应置于-80℃保存。 2. 该酶在性质上有这样一个特点：DNA即使具有3’突出末端，有时也因其末端及序列的不同而被作为底物降解。  例如： 一个碱基突出型 (Eam11051 I等) 二个碱基突出型 (Pvu I、Sac II等) 三个碱基突出型 (Sfi I等) 四个碱基突出型 (Apa I被确认，Ban II及BstX I也有可能)。