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ATP Dependent DNase
品牌Code No.包装量价格说明书
Takara2225200 U410 元

制品内容

ATP Dependent DNase (10 U/μl)200 U
10×ATP Dependent DNase Buffer0.5 ml


制品说明

本制品在含有ATP的Buffer (制品中添附) 反应体系中,能够特异性地水解线性双链DNA产生脱氧核糖核酸,对环状双链DNA不起作用。本制品可用于除去质粒或粘粒等环状DNA样品中残留的少量线性基因组DNA片段的污染,减少对后续实验的影响。 
在基因工程实验中,制备的质粒和粘粒,即使是通过氯化铯/溴乙锭梯度离心方法或其它严格的方法制备,也常含有碱裂解操作过程中带来的少量细菌基因组DNA片段的污染,尤其在制备低拷贝克隆载体的质粒或粘粒等时,这种现象更为明显。使用本制品可以有效除去样品中的基因组DNA,然后通过70℃、5 min的加热处理即可使本酶完全失活,从而减少基因组污染物对质粒或粘粒等的常规分析、亚克隆和序列测定等后续实验结果的影响。


保存

-20℃。


起源
Micrococcus luteus


活性定义
以线性化的pMD18 DNA为底物,在1 mM ATP存在、pH9.4缓冲液中,37℃反应30分钟,催化生成1 nmol脱氧核苷酸所需要的酶量,定义为1活性单位 (U)。 

在10 μl反应体系中,加入本制品0.2 U,10×ATP Dependent DNase Buffer 1 μl,0.2 μg的线性化的pMD18 DNA,在37℃条件下反应30分钟,能够使线性化的pMD18 DNA产生95%以上的降解作用。


纯度
在10 μl反应体系中,加入本制品1 U,10×ATP Dependent Dnase Buffer 1 μl,1 μg的λ DNA和0.2 μg的pMD18 DNA质粒,在37℃条件下反应16小时,能使90%以上的λ DNA电泳带降解消失,同时pMD18 DNA的电泳谱带不发生变化。

用途
1. 低拷贝的质粒或粘粒的提取。

2. 除去质粒等环状DNA中线性基因组DNA污染物。


使用注意
本制品来源于天然菌体,过量使用会造成目的环状DNA回收量降低。



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