Recombinant DNase I (RNase-free)

Recombinant DNase I (RNase-free)
品牌	Code No.	包装量	价格	说明书
Takara	2270A	1,000 U	500 元
Takara	2270B (A × 5)	5,000 U	2,250 元

制品内容 (Code No.: 2270A)

Recombinant DNase I (RNase-free；5 U/μl)	1,000 U
10 × DNase I Buffer	1 ml

制品说明

本酶是将单链或双链DNA同等程度的随机分解，生成具有5’-P末端寡核苷酸的脱氧核糖核酸内切酶。 
由于本酶几乎完全除去了蛋白酶，从而提高了在pH中性区域的稳定性，适用于RNA的制备。

保存

-20℃。

起源

Recombinant enzyme derived from non-animal host.

活性定义

以小牛胸腺DNA为底物，在25℃、pH5.0的条件下，1分钟内使反应液的260 nm吸光度增加0.001所需要的酶量定义为1个活性单位 (Kunitz Unit)。

纯度

10 units的本酶和1 μg的16S, 23S rRNA在37℃、pH7.5的条件下反应4小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

用途

1. 用T7或SP6 RNA Polymerase进行体外转录 (In vitro transcription) 时，合成RNA后，不必更换Buffer，使用Recombinant DNase I (RNase-free) 即可将模板DNA降解。 
2. 与DNA Polymerase I (Code No. : 2130) 一起用于切口平移。 
3. 在Mn²⁺存在的条件下，为鸟枪法测序 (Shotgun sequencing) 制作DNA文库。 
4. 用于足迹法 (Foot-printing) 分析DNA-蛋白质相互作用。 
5. 在进行RT-PCR反应前，对基因组DNA进行降解。

使用注意

本酶已除去蛋白酶，在最适中性pH范围内稳定。反应时需要二价金属离子参与，Mg²⁺存在时，能随机使双链DNA产生切口；Mn²⁺存在时，双链DNA的两条链被分解为片段。加入EDTA可使酶可逆性失活，80℃加热10分钟则不可逆性失活。