T7 RNA Polymerase

T7 RNA Polymerase
品牌	Code No.	包装量	价格	说明书
Takara	2540A	5,000 U	1,950 元
Takara	2540B (A × 5)	25,000 U	8,780 元

制品内容

T7 RNA Polymerase (50 U/μl)	5,000 U
10 × T7 RNA Polymerase Buffer	1 ml
50 mM DTT	1 ml

制品说明

本酶是噬菌体T7 DNA编码的酶，以含有T7启动子序列的双链DNA为模板，以NTP为底物，合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。本酶对T7启动子序列具有高度特异性，不能识别其它生物来源的启动子。

保存

-20℃。

起源

Escherichia coli carrying the plasmid containing the gene for phage T7 RNA polymerase gene.

性质

1. 分子量：约98,000。 2. 亚单位：单一的多肽。 3. 最适pH：pH8.0。 4. 辅因子：Mg2+(最适浓度：8 mM)，还原剂 (5 mM DTT)。 5. 激活剂：2 mM亚精胺 (4 mM亚精胺与DNA形成共沉淀)。 6. 抑制剂：NEM(10-4 M)、PCMB(5×10-8 M)。

活性定义

在37℃、pH8.0的条件下，1小时内使1 nmol的 [3H] GMP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。

纯度

1. 250 units的本酶和1 μg的λDNA-Hind III分解物在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。 2. 250 units的本酶和1 μg 的超螺旋pBR322 DNA在37℃下反应4小时，DNA的电泳谱带不发生变化。 3. 250 units的本酶和1 μg 的16S，23S rRNA 在37℃下反应5小时，RNA的电泳谱带不发生变化。 4. SDS-PAGE：＞95%。

用途

1. 合成单链RNA。 2. 合成高特异性RNA探针。 3. 合成siRNA前体。 4. 制作RNA剪接反应 (RNA Splicing) 的前体。 5. 以帽类似物 (Cap analog) 为引物，制作Capped mRNA。

使用注意

1. 为了特定区域的有效转录，建议在其区域下游把模板DNA预先切成平端或5′突出末端。 2. 缓冲液中的亚精胺与核酸结合可能形成不溶物。建议最后加入模板DNA。

关联信息

参考文献

T7 RNA Polymerase的使用文献