DNA Polymerase I (E. coli)

DNA Polymerase I (E. coli)
品牌	Code No.	包装量	价格	说明书
Takara	2130A	500 U	260 元
Takara	2130B (A × 5)	2,500 元	1,170 元

制品内容

DNA Polymerase I (5 U/μl)	500 U
10×E.coli DNA Polymerase I Buffer (含0.025% BSA)	1 ml

制品说明

DNA Polymerase I 在模板和引物 (DNA或RNA) 存在的条件下，以dNTP作底物，沿5′→3′方向合成与模板互补的DNA。本酶分子量约为109,000，具有双链特异性的5′→3′外切核酸酶活性以及单链特异性的3′→5′外切核酸酶的活性。本酶是由带有编码E.coli DNA Polymerase I基因的大肠杆菌精制而成的。

保存

-20℃。

起源 Escherichia coli carrying the plasmid which encodes the gene of Pol I. 活性定义 以合成的Poly d (A-T) DNA为模板/引物，在37℃、pH7.4的条件下，30分钟内使10 nmol 的全核苷酸掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。 纯度 1. 10 units的本酶和1 μg的超螺旋pBR322 DNA在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。 2. SDS-PAGE：＞90%。 用途 1. 与DNase I (Code No.: 2212) 一起使用，进行切口平移 (Nick translation)。 2. 通过Okayama-Berg法合成cDNA的第二条链 (0.3 μg DNA Polymerase I 约为2.5 units)。 使用注意 1. 酶在保存条件下半年内稳定，稀释也不失活，但剧烈搅拌会使酶失活。 2. 不含内切酶活性，单独使用不表现切口平移活性。 3. 由于同DNA有较强的亲和性，过量使用易发生凝集作用 (Aggregation)，会使反应不能充分进行。