SP6 RNA Polymerase

SP6 RNA Polymerase
品牌	Code No.	包装量	价格	说明书
Takara	2520A	3,000 U	700 元
Takara	2520B (A × 5)	15,000 U	3,150 元

制品内容

SP6 RNA Polymerase (50 U/μl)	3,000 U
10×SP6 RNA Polymerase Buffer	1 ml
100 mM DTT	1 ml
0.1% BSA	1 ml

制品说明

本酶是鼠伤寒沙门氏菌LT2的噬菌体SP6 DNA编码的酶，分子量为96,000。本酶以含有SP6启动子序列的双链DNA为模板，以NTP为底物，合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA对SP6启动子序列具有高度特异性，不能识别其它生物来源的启动子。

保存

-20℃。

起源

Escherichia coli carrying the plasmid containing the gene for phage SP6 RNA polymerase gene

活性定义

在37℃、pH7.5的条件下，1小时内使1 nmol的 [3H] GMP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位(unit)。

纯度

1. 500 units的本酶和1 μg的λ-Hind III分解物在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

2. 500 units的本酶和1 μg的pBR322 DNA在37℃下反应4小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
3. 500 units的本酶和1 μg的16S，23S rRNA 在37℃下反应16小时，RNA的电泳谱带不发生变化。
4. SDS-PAGE：＞95%。

用途

1. 为Northern杂交以及Southern杂交制作高标记探针。  2. 制作RNA剪接反应 (RNA Splicing) 的前体。  3. 以帽类似物 (Cap analog) 为引物，制作Capped mRNA。

使用注意

1. 最适pH为7.5，需要Mg2+和还原剂的存在，添加BSA及亚精胺可提高酶的活性。 2. 最适反应温度为40℃ (此时酶活性为37℃时的130%)，当所用酶量不超过300 U/ml，模板量不超过0.1 mg/ml时与RNA的合成量呈正比例。 3. 为了特定领域的有效转录，建议在其领域下游把模板DNA预先切成平端或5′突出末端。 4. 缓冲液中所含亚精胺容易与核酸形成复合物产生不溶物，建议最后加入DNA模板。