T4 DNA Polymerase

T4 DNA Polymerase
品牌	Code No.	包装量	价格	说明书
Takara	2040A	100 U	260 元
Takara	2040B (A × 5)	500 U	1,170 元

制品内容

* BSA在-20℃下易产生沉淀，应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。

制品说明

在模板及引物存在的条件下，催化与模板互补的脱氧核苷酸依次选择性地连接在引物的3′-OH末端上的反应。本酶还具有单链DNA特异性的3′→5′外切核酸酶活性，该活性比Klenow Fragment强100～1,000倍。本酶没有5′→3′的外切核酸酶活性。

保存

-20℃。

起源

Escherichia coli carrying the plasmid containing phage T4 DNA polymerase gene

活性定义

以合成的Poly (dA-dT) DNA为摸板/引物，在37℃、pH8.8条件下，30分钟内使10 nmol的dATP和dTTP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量，定义为1个活性单位 (U)。

纯度

2 units的本酶和1 μg的超螺旋 (Form I) pBR322 DNA在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。

用途

1. 利用较强的3′→5′的外切核酸酶活性，通过置换合成从DNA片段的3’末端进行标记。  2. DNA末端的平滑化。  3. 通过引物延伸法解析mRNA转录的起始点。

使用注意

1. 本酶的最适pH为8-9，在pH7.5及pH9.7时活性降低50%。  2. 活性的表达需要Mg2+的存在。为了获得最大活性，还需要SH基的还原剂存在。 3. 整个反应体系中的离子强度超过100 mM时活性将被抑制。 4. 本酶易受模板DNA高级结构的影响，T4 gene 32产物可以显著提高聚合酶活性，而3′→5′的外切核酸酶活性则完全被抑制。