T4 Polynucleotide Kinase

T4 Polynucleotide Kinase
品牌	Code No.	包装量	价格	说明书
Takara	2021S	500 U	300 元
Takara	2021A	1,000 U	540 元
Takara	2021B (A × 5)	5,000 U	2,160 元

制品内容 (Code No.: 2021S)

T4 Polynucleotide Kinase (10 U/ μl)	500 U
10×T4 Polynucleotide Kinase Buffer	1 ml

制品说明

本酶具有以下活性：

1. 5′-OH末端寡核苷酸的磷酸化及5′-P末端寡核苷酸的去磷酸化。
5′-OH + ATP→5′-P + ADP
2. 磷酸交换反应
5′-P + ATP + ADP←→5′-P + ADP + ATP

保存

-20℃。

起源

Escherichia coli carrying the plasmid encoding T4 pse T gene

活性定义

以Micrococcal Nuclease处理的小牛胸腺DNA为底物，在37℃，pH7.6的条件下，30分钟内使1 nmol的[γ-32P]ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。

纯度

1. 10 units的本酶和1 μg的λ DNA-Hind III片段在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。  2. 5 units的本酶和1 μg的16S，23S rRNA在37℃下反应16小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

用途

1. DNA及RNA 5′末端的标记。 2. 合成DNA接头 (Linker) 的5′末端磷酸化。

特性

1. 分子量：约140,000。 2. 亚基：四个亚基，分子量均为33,000，活性形式为四聚体。  3. 辅因子：反应需要Mg2+和SH试剂如DTT的参与。  4. 抑制剂：7 mM的磷酸、焦磷酸盐或磷酸钠能够抑制酶50%的活性，7 mM的硫酸铵抑制酶75%的活性。