Alkaline Phosphatase (Calf intestine)

Alkaline Phosphatase (Calf intestine)
品牌	Code No.	包装量	价格	说明书
Takara	2250A	1,000 U	420 元
Takara	2250B (A × 5)	5,000 U	1,890 元

制品内容

Alkaline Phosphatase (30 U/μl)	1,000 U
10 × Alkaline Phosphatase Buffer	1 ml

制品说明

本酶是由分子量为50,000的单体组成的二聚体，活性形式为含有Zn²⁺的糖蛋白的金属酶。与大肠杆菌由来的酶同样，催化所有磷酸单酯的水解，不能催化磷酸二酯以及磷酸三酯的水解。

保存

-20℃。

起源

Yeast carrying the plasmid which encodes the gene of calf intestine alkaline phosphatase

活性定义

在37℃、pH9.8的条件下，1分钟内水解对硝基苯磷酸盐 (p-nitrophenyl phosphate) 生成1 μmol的对硝基苯酚 (p-nitrophenol) 所需要的酶量定义为1个活性单位 (unit)。

纯度

1. 30 units的本酶和1 μg的λ-Hind III片段在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。 2. 30 units的本酶和1 μg 的pBR322 DNA 在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。 3. 18 units的本酶和1 μg的16S，23S rRNA在37℃下反应16小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

用途

去除载体DNA片段的5′-末端的磷酸基团。

使用注意

底物浓度高时，本酶最适pH约为10；底物浓度低时，最适pH约为8，但特异性比高底物浓度时低。本酶在保存条件下极其稳定，而在螯合剂存在的条件下，经65℃、30分钟加热处理，99%的活性不可逆失活 (根据反应条件不同有时也有例外) 。建议失活处理时使用苯酚，可使酶完全失活。