E.coli DNA Ligase

E.coli DNA Ligase
品牌	Code No.	包装量	价格	说明书
Takara	2160A	1,000 U	160 元
Takara	2160B (A × 5)	5,000 U	720 元
Takara	2161	1,000 U	160 元

制品内容

Code No.: 2160A
E.coli DNA Ligase (60 U/μl)	1,000 Units

Code No.: 2161
E.coli DNA Ligase (60 U/μl)	1,000 Units
10 × E.coli DNA Ligase Buffer	100 μl
10 × BSA (0.05%)*	100 μl

* BSA在-20℃下易产生沉淀，应尽量避免多次反复冻融。短期使用请在4℃下保存。产生稍许沉淀不影响反应效果。

制品说明

本酶催化相邻DNA链的5′-P末端和3′-OH末端以磷酸二酯键结合的反应，与T4 DNA Ligase作用相同。分子量为77,000，最适反应pH为7.5-8.0 (Tris-HCl buffer)。反应需NAD作辅酶。与T4 DNA Ligase可连接粘性末端和平末端相比，本酶只能催化突出末端DNA之间的连接，但如果在PEG及高浓度一价阳离子存在的条件下，也能连接平滑末端的DNA。与T4 DNA Ligase能将DNA的5′-P末端与RNA的3′-OH以及RNA的5′-P末端与DNA的3′-OH连接不同，本酶不能催化DNA与RNA以及RNA之间的连接。

保存

-20℃。

起源

Escherichia coli UT481 carrying the plasmid encoding the ligase

活性定义

在20 μl的连接反应体系中，6 μg的λ DNA-Hind III在16℃下反应30分钟时，有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为一个活性单位 (U)。

纯度

1. 360 U的本酶和1 μg的λ DNA-Hind III片段在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。 2. 360 U的本酶和1 μg的Supercoiled pBR322 DNA在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。 3. 360 U的本酶和1 μg的16S，23S-rRNA在37℃下反应1小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

用途

Okayama-Berg法克隆cDNA，实验操作中酶的用量约为50 units。 使用注意 本酶由大肠杆菌克隆体精制而成，几乎不含杂质，是纯度极高的制品。因此，即便是高浓度制品，大量使用也完全没有问题。