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pUC118 Pst I/BAP 品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 Takara 3323 5 μg 450 元
□ 贮存溶液 Tris-HCl (pH 8.0) 10 mM EDTA 1 mM
制品说明
pUC118 Pst I/BAP载体是由pUC118 DNA经其多克隆位点上的限制酶Pst I 酶切后，用E.coli 来源的碱性磷酸酶 (BAP) 去磷酸化后得到的。这种经BAP处理过的载体可以防止自身环化，转化时可以降低含有空载体的转化细胞数量。这种载体使用前不需要任何处理，可直接用于克隆。
保存
-20℃。
制备
使用CsCl-EtBr密度梯度超离心法纯化的pUC118 DNA，经限制酶Pst I 消化后，再使用E.coli来源的碱性磷酸酶 (BAP) 进行去磷化处理。
链 长
3,162 bp (Messing等构建方法的计算值)。
GenBank登录
pUC118：Accession No. U07649
纯度
1. 用1% Agarose电泳，显示单一条带。
2. 使用T4 DNA Ligase对pUC118Pst I/BAP进行自身连接时的转化效率低于未切断pUC118 转化效率的1%以下。
3. 使用T4 Polynucleotide Kinase将pUC118 Pst I/BAP的5’-OH末端磷酸化后，再使用T4 DNA Ligase进行自身连接，然后转化至E.coli JM109 Competent Cell (转化效率为: 1×107Colonies/1 μg pUC118) 时，其转化效率在1×106 Colonies/1 μg DNA以上，此时在含有IPTG、X-Gal的蓝白筛选平板培养基上的白色菌落数在1%以下。
pUC118多克隆位点图
pUC118载体图谱
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