DNA Blunting Kit

DNA Blunting Kit
品牌	Code No.	包装量	价格	说明书
Takara	6025	20 次	530 元

制品内容 (20 次量) 

T4 DNA Polymerase	20 μl
10×Buffer (含dNTP)	30 μl
DNA Dilution Buffer	500 μl
(100 mM Tris-HCl < pH7.6，16℃> ,5 mM MgCl2)
Ligation Solution A*	600 μl × 2
Ligation Solution B*	150 μl
*：Ligation solution A和B与DNA Ligation Kit ver.1 (Code No.：6021) 通用。

制品说明

DNA Blunting Kit可使具有3’或5’突出末端的DNA平滑化。在T4 DNA Polymerase 5’→3’的聚合酶活性和3’→5’的外切酶活性的作用下，两种不同形式的粘性末端可被同时平滑化。再使用本试剂盒中的连接液即可高效地将得到的平末端DNA与平末端载体相连。并且反应液不需纯化，可以直接用于细菌转化和体外包装等。
本试剂盒也可将载体DNA的末端平滑化。经平滑化后的载体DNA再进行去磷酸化后使用。 
很多PCR产物都含有3’-dA末端，因而不能有效连入载体。如果使用本试剂盒将此类PCR产物末端平滑化，再根据实际情况进行磷酸化处理，就可以有效地连入平末端载体。

保存

-20℃。 DNA末端平滑化原理 使用注意 1.本试剂盒可使具有去磷酸化的5’突出末端的DNA末端平滑，但不能使磷酸化的3’凹陷末端的DNA末端平滑。在鸟枪法克隆时，应注意超声波分解的DNA片段，可能会产生具有磷酸化的3’凹陷末端的DNA片段。 2. Ligation Solution A和B置于冰中融解，使用前快速混匀。 3. 做细菌转化时，连接液不需要做苯酚抽提便可直接使用。如果有必要浓缩，可用乙醇沉淀法精制DNA。