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One Step SYBR® PrimeScript™ RT-PCR Kit (Perfect Real Time) 品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 Takara RR066A 50 μl反应 × 100 次 2,420 元 Takara RR066B (A × 5) 50 μl反应 × 500 次 10,890 元 ■ 制品内容 (Code No.: RR066A: 50 μl反应×100次)
2×One Step SYBR® RT-PCR Buffer Ⅲ*1 840 μl × 3 支 TaKaRa Ex Taq HS (5 U/ μl) 100 μl PrimeScript RT Enzyme Mix Ⅱ*2 100 μl RNase Free dH2O 1.25 m l × 2 支 ROX Reference Dye (50×)*3 100 μl ROX Reference Dye II (50×)*3 100 μl *1 内含dNTP Mixture,Mg2+,SYBR® Green I 等,避光保存。
*2 内含PrimeScript RTase 和RNase Inhibitorr。
*3 ROX Reference Dye/ Dye II是用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。
◆ 需要使用ROX Reference Dye校正的仪器
ABI PRISM 7000/7700
Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System (Life Technologies)
◆ 需要使用ROX Reference Dye II校正的仪器
Applied Biosystems 7500和7500 Fast Real-Time PCR System(Life Technologies)Limited Use Label License:[L11], [L46], [P5]
■ 制品说明
本制品是采用SYBR® Green I 嵌合荧光法进行One Step RT-PCR反应的专用试剂。使用本制品进行Real Time RT-PCR反应可在同一反应管内连续进行,操作简单,并能有效防止污染。本反应体系由于可以对扩增产物进行实时检测,大大提高了检测灵敏度,并省略了PCR反应后的电泳步骤,非常适合于RNA病毒等微量RNA的检测。
本制品中使用了最适合于Real Time RT-PCR的反转录酶PrimeScript RTase和具有高扩增效率和高扩增特异性的TaKaRa Ex Taq HS,能进行稳定的Real Time One Step RT-PCR反应。■ 保存
-20℃。 2 × One Step SYBR RT-PCR Buffer Ⅲ 请于-20℃避光保存。 ■ 试剂盒特长
1. 进行Real Time One Step RT-PCR反应,可以快速、准确地对RNA病毒等微量RNA 进行分析。
2. PCR用DNA聚合酶使用了TaKaRa Ex Taq HS,可以进行Hot Start法PCR反应,再与Takara公司独自开发的Buffer系统相结合,具有高扩增效率,高扩增灵敏度之特点。2×One Step SYBR RT-PCR Buffer III中预先混有SYBR® Green I等,反应液配制十分简单方便。■ 使用注意
1. 当同时需要进行数次Real Time One Step RT-PCR反应时,应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix;其中包括RNase Free dH2O、Buffer、各种酶等),然后再分装到每个反应管中。这样,可使所取的试剂体积更准确,减少试剂损失,避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。
2. 使用TaKaRa Ex Taq HS、PrimeScript RT Enzyme Mix Ⅱ时,应轻轻混匀,避免起泡;分取之前要小心地离心收集到反应管底部;由于酶保存液中含有50%的甘油,粘度高,分取时应慢慢吸取。
3. 2×One Step SYBR RT-PCR Buffer Ⅲ 融解后如有不溶物请充分混合。
4. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等,尽量避免污染。
5. 制品只能使用特异性反转录引物,不能使用Random Primer 和Oligo dT Primer 等进行反转录反应。





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