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Fungi Identification PCR Kit 品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 Takara RR178 50 次 800 元
制品内容 (50 次量)
PCR Premix* 500 μl × 3 支 PCR primers: D1/D2 Forward Primer (20 pmol/μl) 30 μl × 1 支 D1/D2 Reverse Primer (20 pmol/μl) 30 μl × 1 支 ITS Forward Primer (20 pmol/μl) 30 μl × 1 支 ITS Reverse Primer (20 pmol/μl) 30 μl × 1 支 Seq primers: Seq Forward Primer (10 pmol/μl) 20 μl × 1 支 Seq Reverse Primer (10 pmol/μl) 20 μl × 1 支 Positive Control DNA (5 ng/μl) 10 μl × 1 支 dH2O 1 ml × 3支 * PCR Premix中含有TaKaRa Ex Taq®、反应用Buffer、dNTP Mixture等，应尽量避免反复冻融。
制品说明
本试剂盒是利用分子生物学手段进行真菌菌种鉴定的试剂盒。使用试剂盒中的引物，PCR扩增未知真菌的26S rDNA D1/ D2区域或ITS全序列 (包括ITS1、5.8S rDNA、ITS2)，经测序后与GenBank中已知的序列进行同源性比较，可以对未知菌种进行鉴定。
真菌的传统鉴定方法主要以细胞的表型特征为依据，包括细胞形态、生理、生化等方面。传统鉴定方法比较费时、费力，而且有时不够准确，例如有些真菌的有性生殖阶段与无性生殖阶段的形态特征差别很大，难以从表观特征上加以区分，使传统的鉴定方法受到限制。近年来发展起来的26S rDNA D1/ D2区序列及内转录间隔区ITS (Internal Transcribed Spacer) 序列分析技术，克服了传统鉴定方法中的诸多不足，能够快速、准确地对真菌进行鉴定，为建立一个符合客观实际的自然分类系统奠定了基础。
真菌基因组中编码核糖体的基因包括4种，26S rDNA、5S rDNA、18S rDNA和5.8S rDNA。它们在染色体上头尾相连、串联排列，相互之间由间隔区分隔。真菌的26S rDNA，可分为D1、D2、D12等多个区域，其中D1/ D2区域序列长度为500-600 bp左右，可用于真菌鉴定。几乎所有已知酵母菌种模式菌株的D1/ D2区序列都已被测定。真菌的ITS，包括ITS1及ITS2两部分，全长在300-1,000 bp左右，进化速度快，具有多态性，对于亲缘关系较近的菌株的区分鉴定较适合。使用本试剂盒可将未知真菌鉴定到属或种。
本试剂盒提供了PCR扩增真菌26S rDNA D1/ D2区序列及ITS全序列的所有试剂，同时还提供了一对测序引物 (正向测序引物Seq Forward Primer，反向测序引物Seq Reverse Primer)。试剂盒中的Positive Control DNA可以进行Control实验，用于检测试剂盒的PCR扩增性能，判断PCR反应是否正常进行等。
本试剂盒可以对绝大多数真菌进行鉴定，特别适用于那些难以培养的真菌及传统表型方法鉴定困难的真菌。
保存
-20℃保存，使用时请在冰上融化。
注意事项
1. 操作注意。
① 实验要在超净工作台中进行，以防其它真菌污染。
② 实验人员应穿无污染的实验服，戴口罩和手套，预先用70%乙醇对实验器具进行消毒。
③ 实验应使用专门的仪器和耗材，例如，专用的微量移液器及配套Tips。开启Microtube要小心，防止污染等。
2. PCR Premix的使用方法。
PCR Premix中含有TaKaRa Ex Taq，应避免反复冻融，一旦融解，请分装保存。
3. 实验所用真菌应为纯菌，以确保实验的可信度。
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