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Real Time One Step RT-PCR SARS Virus Detection Kit 品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 Takara RR920 20 次 1,500 元
制品内容 (20 次量)
TaKaRa Ex Taq HS (5 U/μl) 10 μl 2×One Step RT-PCR Buffer Ⅲ*1 840 μl PrimeScript RT Enzyme Mix Ⅱ*2 10 μl SARS Internal Control RNA (102 copies/μl) 30 μl SARS Positive Control RNA (105 copies/μl) 15 μl SARS Primer Mix (各10μM) 30 μl SARS Probe Mix (各3μM) 30 μl EASY Dilution (for Real Time PCR)*3 1 ml RNase Free dH2O 500 μl *1 内含dNTP Mixture，Mg2+等。
*2 内含RTase、Inhibitor。*3 是制作标准曲线时梯度稀释DNA或RNA标准品的稀释液。模板DNA或模板RNA如果用水或TE稀释时，由于受Microtube的吸附作用等原因的影响，往往不能准确地进行稀释，导致实验结果精度降低。使用本制品时，即使稀释至低浓度也能够进行准确地稀释，容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。EASY Dilution也可以单独购买 (Code No.: 9160)。
制品说明
本试剂盒是用于检测SARS病毒RNA的Real Time One Step RT-PCR试剂盒。使用具有较强延伸能力的PrimeScript RTase将SARS病毒RNA反转录为cDNA，然后使用Hot Start DNA聚合酶TaKaRa Ex TaqHS扩增cDNA，全部反应在同一反应体系中一步完成，即采用了One Step RT-PCR的方法，再通过进一步与双标记荧光探针法相结合，可以对SARS病毒进行简单快速的高灵敏度、高特异性实时检测。
本试剂盒中含有SARS病毒检测用的FAM标记探针，同时还含有SARS Internal Control RNA和SARS Internal Control RNA检测用的ROX标记探针，可以进行两色荧光双通道同时实时检测，无需电泳，检测快速，并能防止PCR产物污染所产生的假阳性结果。SARS Internal Control RNA的检测还可以排除因样品的纯度等问题而造成的假阴性结果。使用试剂盒中的Positive Control RNA制作标准曲线，同时可以对SARS病毒进行定量分析。
保存
-20℃。
注意事项
1. SARS病毒具有高度传染性，样品的采集、处理、保存、运输、检测实验均应遵循国家相应的管理规定 和生物安全条例。必须做好相关的保护措施，以确保实验人员安全。
2. 本试剂盒检测灵敏度高，为了防止污染，实验要分区操作。
① 第一区：反应液配制区。
② 第二区：样品制备区。
③ 第三区：样品添加区及反应检测区。
三个区间必须进行物理性隔离， 避免人为因素造成污染。
3. 本试剂盒所使用的SARS Positive Control RNA是通过人工合成DNA后，再经体外转录得到的。使用安全，无感染性。
4. 为了防止RNA分解，RNA样品应尽量避免反复冻融，并尽可能保存于-70℃～-80℃。
5. 荧光标记探针应避光保存。
6. 当同时需要进行数次Real Time One Step RT-PCR反应时，应先配制各种试剂的混合液 (Master Mix；其中包括RNase Free dH2O、Buffer、各种酶等)，然后再分装到每个反应管中。这样，可使所取的试剂体积更准确，减少试剂损失，避免重复分取同一试剂。同时也可以减少实验操作或实验样品之间产生的误差。
7. 使用TaKaRa Ex Taq HS、PrimeScript RT Enzyme Mix Ⅱ时，应轻轻混匀，避免起泡；分取之前要小心地离心收集到反应管底部；由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取。
8. 2×One Step RT-PCR Buffer Ⅲ融解后如有不溶物请充分混合。
9. 配制Real Time One Step RT-PCR反应液时应避免强光照射。
10. 反应液的配制、分装请一定使用新的 (无污染的) 枪头、Microtube等，尽量避免污染。
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