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  • Cycleave® PCR呼吸系统感染病原菌Detection Kit Ver.2

Cycleave® PCR呼吸系统感染病原菌Detection Kit Ver.2
品牌Code No.包装量价格说明书
TakaraCY21460 次2,800 元


制品内容 (25 μl反应×10次量×6种)

2×CycleavePCR Reaction Mixture*1750 μl(60次反应量)
Probe / Primer Mix - 1*220 μl(10次反应量)
Probe / Primer Mix - 2*220 μl(10次反应量)
Probe / Primer Mix - 3*220 μl(10次反应量)
Probe / Primer Mix - 4*220 μl(10次反应量)
Probe / Primer Mix - 5*220 μl(10次反应量)
Probe / Primer Mix - 6*220 μl(10次反应量)
dH2O750 μl
Positive Control 1 - FAM10 μl
Positive Control 2 - FAM10 μl
Positive Control 3 - FAM10 μl
Positive Control 4 - FAM10 μl
Positive Control 5 - FAM10 μl
Positive Control 5 - ROX10 μl
Positive Control 6 - FAM10 μl
Positive Control 6 - ROX10 μl

*1 含有反应用Buffer、dNTP和酶。溶解时不要振荡混合。
*2 含荧光标记探针,应避光保存。


制品说明

肺炎、化脓性脑膜炎等感染性疾病需要对病原菌作出快速、准确的判断,以便使用相应的抗菌素来进行疾病的治疗。不同病原菌所选择的抗菌素也不同。另外,在肺炎、化脓性脑膜炎等感染性疾病中分离出来的频率较高的肺炎球菌、流感杆菌和支原体中,具有耐药性的病原菌也逐渐增多。
本制品是在北里大学北里生命科学研究所生方公子教授的指导下研发的Real Time PCR用试剂盒。对易引发感染症、导致病情加重、及病原菌鉴定时间长的6种病原菌 (肺炎球菌、流感嗜血杆菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、嗜肺军团菌及A型链球菌) 利用Real Time PCR进行检测。
肺炎球菌、流感嗜血杆菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、嗜肺军团菌及化脓性链球菌等易引发肺炎、化脓性脑膜炎或导致病情加重,并且对这几种病原菌的判定时间长。本制品是利用Real Time PCR对这6种病原菌进行检出的试剂盒。
制品中使用Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS,可以有效地抑制在配制反应液时发生的引物错配及引物二聚体引起的非特异性扩增,大大提高PCR的检测灵敏度。
本制品采用Cycling Probe法进行检测,Cycling Probe法是由RNA和DNA构成的杂合探针与RNase H组合使用的高灵敏度检出法,能够高效率地检出扩增过程中及扩增结束时的目的基因片段。Cycling Probe内部含有RNA碱基,一端标记荧光物质,另一端标记荧光淬灭物质,当探针处于完整状态时,由于荧光淬灭作用抑制荧光物质发出荧光,但当探针与扩增产物中的互补序列杂交后,RNase H在RNA部分将探针切断,淬灭抑制作用解除,荧光物质发出荧光。通过测定荧光强度,能够实时监控扩增产物量。
在同一反应管内进行PCR扩增和Real Time PCR检出,无需电泳,可快速获得反应结果。还可以避免扩增产物污染其他检测样品。
本制品中附带各目的基因的阳性对照,可准确地进行结果判定。


保 存

-20℃。
组份2×CycleavePCR Reaction Mixture中含有酶,建议融解后分成小包装保存。
短期保存时,可于4℃保存。
开封后,阳性对照要与其它组份分开保存于-20℃。


注意事项

1. Real Time PCR仪的使用请按照各自的说明书进行操作。
2. 如果杂合探针、引物因混入核酸酶而被降解,则不能准确进行检测。实验者的汗液和唾液也会带入核酸酶,操作时应注意。
3. PCR反应是灵敏度非常高的反应。为防止污染,建议从反应液的配制到检测的实验过程中,设定以下3个实验区域,并进行物理性隔离。
区域1:反应液的配制及分装。
区域2:检测样品的制备。
区域3:向反应液中添加检测样品,进行反应、检出。
由于本制品使用Real Time PCR法,扩增反应与检测同时进行,反应后的扩增产物不需要再进行电泳。为了避免污染,严禁从Tube管中取出扩增产物。
4. 使用本制品获得的结果是以Real Time PCR仪的分析为基础来判定的。如果Real Time PCR仪的任一Auto功能出现问题都可能导致错误的判定结果,因此要依据仪器说明书来正确设置Real Time PCR仪。

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