TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit

TaKaRa PCR Carryover Prevention Kit
品牌	Code No.	包装量	价格	说明书
Takara	6088	200 次	2,000 元

制品内容 (200 次量)

UNG (2 U/μl)	100 μl
dU plus dNTP Mixture* (12.5×)	800 μl
MgCl2 (25 mM)	1 ml
* dU plus dNTP Mixture的Na盐溶液组成如下： dUTP 7.5 mM；dATP 2.5 mM；dGTP 2.5 mM；dCTP 2.5 mM

制品说明

PCR是一种极敏感的DNA扩增技术，易受污染影响，PCR扩增产物的污染会产生假阳性结果。PCR扩增产物的污染是End-point PCR方法，特别在食品、环境检测中是令人头痛的问题。 
本制品是一种可防止假阳性产生的试剂盒。使用本制品是在PCR反应时以dUTP取代dTTP，并同时使用对含有dU的DNA具有降解作用的UNG酶 (Uracil-N-glycosylase)。在PCR反应前加入UNG可降解含有尿嘧啶的PCR产物，而对不含尿嘧啶的模板无任何影响，可选择性水解含有尿嘧啶的PCR产物。 UNG的作用原理：在PCR反应前25℃、10分钟反应中，UNG酶可水解PCR反应液中含有尿嘧啶的PCR产物的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的N-糖苷键，释放游离尿嘧啶。随后进行95℃、2分钟热处理，在UNG酶失活的同时进一步对磷酸骨架水解，从而消除含有尿嘧啶的PCR产物的污染。UNG酶可以作用于单链或双链DNA，对RNA无活性。
本试剂盒除含有UNG酶外还附带含有dUTP的dNTP Mixture以及MgCl2溶液。使用本试剂盒时请与TaKaRa TaqHot Start Version (Code No.: R007A/B) 等Pol I 型PCR酶组合使用。

保存

-20℃。

注意事项

从反应液的配制到PCR产物的检出应分别在4个操作区操作，操作区推荐进行物理性隔离。 
操作区1：反应液的配制及分装。 
操作区2：样品的制备。 
操作区3：将样品添加到反应液中。
操作区4：PCR反应及凝胶电泳对PCR产物进行检出。 
为防止污染，除在操作区4外请避免对PCR扩增产物tube进行开闭。